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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)和ProteoSOLVE溶解劑破壞秀麗廣桿線蟲(Cae

發(fā)表時(shí)間:2009/2/27

沒有任何其他的多細(xì)胞生物像線蟲一樣在細(xì)胞和分子水平上研究的那么深入。然而,線蟲類堅(jiān)硬的外表皮阻止了細(xì)胞溶解并且阻止蛋白質(zhì)學(xué)和糖蛋白質(zhì)學(xué)的研究步 伐。表皮主要由殼質(zhì)和膠原質(zhì)組成,其中膠原質(zhì)富含N端和C端半胱氨酸,而且這兩種氨基酸常以二硫鍵相連。一些酶類比如幾丁質(zhì)酶和膠原酶能夠用于弱化表皮。 但是,除非這些酶固定不變,否則這些酶會(huì)產(chǎn)生一些外生蛋白,這些蛋白會(huì)在下游分析中依然存在。另外,酶誘導(dǎo)的細(xì)胞溶解會(huì)給細(xì)胞質(zhì)、膜蛋白及其他非水溶性蛋 白的提取帶來麻煩。ProteoSOLVE溶解劑可以zui大程度的破壞線蟲表皮并增加蛋白產(chǎn)量,該溶解劑若結(jié)合壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)可獲得與其他技術(shù)相比 更多的蛋白量。

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